لینک دانلود و خرید پایین توضیحات
فرمت فایل word و قابل ویرایش و پرینت
تعداد صفحات: 4
ویروس هپاتیت C (HCV) یک ویروس حاوی RNA تک رشته ای و مثبت است و براساس تحلیل توالی RNA تک رشته ای و مثبت است و براساس تحلیل توالی RNA به شش ژنوتایپ سیستم بندی شده است. عفونت با HCV یکی از علل اصلی بیماری هپاتیت در سراسر دنیا است. میزان شیوع عفونت با HCV در جوامع مختلف متفاوت می باشد و بین 0.8 تا 3 درصد گزارش شده است. روش استاندارد تشخیص آلودگی به HCV بوسیله تشخیص وجود آتش بادی بر علیه HCV در سرم با روش ELISA و سپس تأئید ان با روش RIBA صورت می گیرد. جهت مشخص نمودن اینکه آیا ویروس در حال تکثیر می باشد یا خیر از روش RT-Pcn برای تشخیص Rvn ویروس در سرم افرادی که anti-Hcv مثبت دارند استفاده می شود. تشخیص ژلزم ویروس بصورت کیفی و کمی در پیگیری درمان بیماران انترون و یا Ribavirin دریافت کرده اند بسیار کمک کننده است. مطالعات نشان داده اند که تأثیر درمانی داروی انتفرون به همراه ribavinn متفاوت بوده و این تأثیر بین 30 تا 60 درصد گزراش شده است. پاک شدن سرم بیمار از RVA ویروس هپاتیت C در 60 تا 70 درصد از موارد ر پایان طول درمان صورت می گیرد. مطالعات نشان داده اند که 6 ماه پس از نظم دارو حدود 40 تا 50 درصد از بیماران دارای HCV-RNA منفی هستند و بقیه یعنی حدود 50 درصد مجدداً دارای RT-PCR –HCV مثبت شده اند. مطالعات اخیر نشان داده است که HCV در سلول های منو؟؟ وجود دارد و حتی دارای تکثیر نیز در این سلول ها می باشد. بر اساس همین مطالعات این تئوری مطرح شده است که آی سلول های منونوکتر می تواند محلی برای حالت persist ویروس باشند یا خیر و اینکه احتمال عود مجدد و بازگشت ویروس پس از پایان درمان از طریق سلول های منونولکتر وجود دارد؟ برهمین اساس این پروژه نیز طراحی گردید تا تحقیق در مسئله وجود HCVRN در سلول های منونوکلئر بیمارانی که برای اولین بار به کلنیک مراجعه می کنند و هنوز تحت درمان قرار نگرفته اند مورد بررسی قرار گیرد. در این پروزه بیمارانی که دارای آزمایش مثبت awtittw و HCV-RNA می باشند قرار داده می شوند و پس از مخفی شدن ژنوتایپ ویروس درمان برای آنها شروع خواهد شد. و میزان (Vird load) ویروس در زمان پیش از دمران و پس ازدرمان در طول درمان و در پایان درمان در سلول های منونوکلرو سرم آنها اندازه گیری خواهد شد. این گروه به مدت شش ماه پس از پایان درمان برای بررسی عود مجدد ویروس در سرم و در سلول های منونوکلئویتر پی گیری می شوند.
روش مطالعه
در این مطالعه تعداد.................. بیماری مبتلا به HCV که برای اولین بار تشخیص داده شده اند و هنوز درمان برای آنها شروع نشده است مورد مطالعه قرار می گیرند. برای این گروه، آزمایشات معمولی بیوشیمیایی از جمله ALT و همچنین آزمایشات سرولوژیکی anti-Hcv ، RIBA، auti-HBC ، HIV صورت خواهد گرفت. آزمایش HCV-RVA مثبت می شوند آزمایش ژنوتایپ بر روی آنها صورت خواهد گرفت. سپس با توجه به نوع ژنوتایپ بدست آمده و با استفاده از پروتکل درمانی مشخص برای هر ژنوتایپ درمان مخصوص بوسیله پزشک متخصص کبد و گوارش بصورت زیر انجام می شود.
1- Pog.interferon/80mg/one t Ribavinn 1000-12000my/day
2- In Flx 3x106 /+
که درمان برای ژنوتایپ های 1.4 تا یکسال و برای ژنوتایپ های 2.3 به مدت 6 ماه می باشند.
نمونه سرم و خون کامل بیماران برای جداسازی سلول های نرنوکلر با روش فایکول قبل از شروع درمان و سپس در پایان درمن و شش ماه پس از پایان درمان انجام می شود. برای مشاهده تأثیر دارو در پایان سه ماهه اول درمان نیز از بیماران نمونه های خون و سرمتهیه و مورد مطالعه قرار خواهند گرفت. آزمایشاتی که در این مطالعه مودر انجام خواهد شد بصورت می باشند.
از آنجائیکه در این مطالعه می بایستی میزان viral 100d مشخص گردد satup کردن یک Real tinepcr برای HCV مورد نظر است، که ترجیحاً با روش استفاده از (Tayman)probe انجام می شود. به همین منظور بنا به داشتن یک منبع یا کنترل استاندارد است که در این پروژه نیز طراحی کنترل et-PCR برای روش Real-tine انجام خواهد شد. با استفاده از متد cloning قطعه مورد نظر که می بایستی بعناون کنترل در تهیه استاندارد استفاده شود تکثیر شده و سپس پداسمیه مورد نظر دارد: E.rol شده و پس از تکثیر و اطمینان از ورود قطعه مورد نظر رپدالمید، جداسازی پدالمیدهای حاوی قطعه کنترل انجام می شود. پلاسمیه ها شمارش شده و باسدش dilution از آنها برای setup کردن کنترل Red-tine ntpcr استفاده می شود. روش setup شده با کمیت های موجود در بازار نیز مقایسه می گردد. نمونه های سرم و سلول های بیماران جدا شده و آزمایشات کمی و کیفی Hcv-RT-PCR بر روی آنها انجام خواهد شد. جهت نشان دادن اینکه ویروس در سلول ها تکثیر می کند یا خیر با استفاده از روش negative-Sense-Pen این مسئله را نیز مورد مطالعه قرار خواهد گرفت.
تحقیق ویروس هپاتیت C
