گروه بندی دقیق از اصول اولیه برای انتخاب خون سازگار می باشد ، لذا تعیین گروه خون باید به دو روش سلولی و سرمی همزمان انجام گیرد.
در گروه بندی سلولی ( Cell type=forward typing) نوع آنتی ژن موجود در سطح گلبول های قرمز تعیین می گردد و در گروه بندی سرمی (Back type = reverse typing) آنتی بادی های طبیعی ) (AntiA , AntiB در سرم مشخص می شوند ، در نهایت نتیجه هر دو روش باید مطابقت داشته باشد در غیر اینصورت بررسی های بیشتر ضروری است .
تعیین گروه سلولی ( Cell type )
1. چهار عدد لوله را بصورت D,AB,B,A مشخص کنید .
2. در هر لوله یک قطره از آنتی سرمهای مربوطه را بریزید .
3. در هر یک از لوله ها یک قطره از سوسپانسیون 5ـ3% گلبول قرمز بیمار را اضافه نمائید .
( نمونه خون می تواند به صورت لخته یا در ماده ضد انعقاد جمع آوری شده باشد ، برای تهیه رقت 5ـ3% ، نمونه را سه بار با سرم فیزیولوژی شستشو داده و در نهایت مقداری سرم فیزیولوژی اضافه گردد تا گلبول های قرمز به رقت 5ـ3% برسند ، برای تأیید رقت سوسپانسیون می توان از دستگاه میکرو هماتوکریت استفاده کرد .)
4. لوله ها را به آرامی تکان دهید ، سپس بمدت 30 ثانیه با دور 3400 دور در دقیقه (g1000) سانتریفوژ نمائید ( ترجیحاً با استفاده از سروفیوژ )
5. لوله ها را در مقابل نور از نظر آگلوتیناسیون بررسی کنید .
هرگونه آگلوتیناسیون یا همولیز مؤید واکنش مثبت می باشد ، در غیر اینصورت واکنش منفی بوده که باید حتماً از نظر میکروسکوپی نیز کنترل شود .
نکته 1: در روش سل تایپ ، همیشه ابتدا آنتی سرمها داخل لوله ها ریخته شود و سپس کلیه لوله ها از نظر ریختن آنتی سرمها کنترل گردد .
نکته 2 : روش خواندن آگلوتیناسیون : بعد از بیرون آوردن لـولـه هـا از سـروفیوژ ، لوله را کج کرده و به آرامی حرکت می دهیم تا گلبول های چسبیده شده به ته لوله جدا شوند و سپس شدت واکنش را قرائت می کنیم .
تعیین گروه سرمی ( Back type )
1. سه عدد لوله را بصورت A و B و O مشخص کنید .
2. یک قطره از سرم بیمار را در هر لوله بریزید ( لوله ها باید از نظر ریختن سرم کنترل شوند )
3. یک قطره از سوسپانسیون 3 تا 5 درصد گلبول قرمز A Cell و B Cell و O Cell را جداگانه در لوله های مربوطه اضافه نمائید .
_ سوسپانسیون A Cell : مخلوطی از گلبول های قرمز حداقل 2 فرد با گروه خون A می باشد .
_ سوسپانسیون B Cell : مخلوطی از گلبول های قرمز حداقل 2 فرد با گروه خون B می باشد .
_ سوسپانسیون OCell : برای تهیه O cell گلبول های قرمز حداقل 1 فرد با گروه خون O استفاده می شود . درتعیین گروه بندی سرمی استفاده از Ocell الزامی نمی باشد ولی آنتی بادی های نامنظم که در دمای اتاق فعال هستند با این روش شناسایی می شوند .
1) سوسپانسیونهای گلبولهای O,B,A توسط پرسنل بانک خون تهیه می شوند .
2) به آرامی محتویات لوله ها را مخلوط کنید و سپس به مدت 30 ثانیه در دورrpm 3400 با سروفیوژ سانتریفوژ کنید .
3) لوله ها را در مقابل نور به ملایمت تکان داده و از نظر آگلوتیناسیون بررسی نمایید .
4) درصورت هماهنگی و همخوانی بین Back type , Cell type نتیجه گروه خون را می توان گزارش نمود .
شامل 4 صفحه word
دانلود مقاله تعیین گروه خون
